表皮干细胞构建组织工程化角膜上皮植片的制备方法及其用途

本发明公开了一种用表皮干细胞构建的人工角 膜上皮植片的制备及用于移植修复因角膜缘干细胞缺损而失 明的眼表的用途。表皮干细胞构建的人工角膜上皮植片，无菌 采取成人颈部或关中奶山羊耳缘皮肤，用组块培养法和克隆筛 选法分离纯化表皮干细胞，用无血清培养基进行扩增，并对所 获干细胞进行CK19、P63、 integrin－β1等表皮干细胞的标 志蛋白免疫组织化学检测；再将纯化的表皮干细胞接种在去上 皮细胞的人类羊膜支架上，无血清培养基培养，培养21天后， 表皮干细胞在羊膜上分化形成复层，成为表皮干细胞羊膜植 片；经透射电镜观察，表皮干细胞分为5－6层细胞；具有正 常角膜上皮相似结构。以羊为实验动物模型进行自体或同种异 体表皮干细胞羊膜植片移植均取得良好效果。

1.买家委托交易经纪人服务，与交易经纪人签定《交易合同》，并按合同约定付款方式支付款项；

2.交易经纪人确定收到合同约定款项后，与卖家签定《交易合同》，支付合同约定款项；

3.卖家确定收到合同约定款项后，向交易经纪人交付《专利转让委托书》、《转让协议》、《解聘书》各一式两份；

4.交易经纪人确认材料无误后，若买方自行办理转让，则交易经纪人将《专利证书》及转让材料原价交付买方，至此合同完成；

5.若买家委托交易经纪人代办转让手续，交易经纪人确认材料无误后提交办理国家手续，国家专利局1个月左右下发《专利转让手续合格通知书》， 交易经纪人确认转让成功后支付合同约定剩余款项给卖方，并交付《专利证书》、《专利转让手续合格通知书》原件给买方，至此专利转让合同完成。

1.买家交易款项将暂保管于九知网担保账户，九知网全程资金代管，保障买卖双方资金安全。

2.选择委托经纪人服务，均由交易经纪人验证交易品和买卖双方身份信息真实有效性。

3.九知网专属律师事务所将对委托交易全程监督，确保所有交易合同及相关文件合法有效。

4.选择委托经纪人服务，并由九知网向卖家代付定金；待国家知识产权局下发手续合格通知书、并经九知网核实后，支付卖家尾款。

5.选择委托经纪人服务，将由交易经纪人代办国家手续，客户随时可查进度。